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农药登记环境影响试验试材使用现状及管理建议

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自2014年GB/T 《化学农药环境安全评价试验准则》系列国家标准[1]发布以来，我国农药环境安全性测试相关的标准方法每年均以10项左右的速度增长。截止2019年9月，已制定用于农药登记的环境安全性测试标准试验方法相关标准47项，其中：环境归趋类15项、生态毒理学类32项，已初步形成较为完善的标准方法体系，基本覆盖现行《农药登记资料要求》[2]中的农药环境影响试验项目，成为农药环境风险评估体系的重要技术支撑。不同类型的环境生物及土壤试材是农药环境影响试验中的基本试材。生物试材及土壤试材的质量是获得科学、可靠试验数据的重要因素。不同实验室间试验试材的来源、饲育与培养设施、培养方法与环境等是否一致关系着数据的可重复性与可比性。欧洲实验室动物科学协会联合会于2007年专门发布了针对用于标准化测试和其他科学研究目的的动物饲育管理指南[3]。我国目前在农药环境影响试验试材管理方面尚处于起步阶段。

本文归纳总结了国内外农药环境影响试验准则中对试验试材的要求，并针对我国农药登记环境影响资料要求涉及的土壤试材和11类生物试材在国内各相关实验室的使用情况进行了调研，旨在分析农药环境影响试验试材使用中存在的问题并提出解决方案，进一步提高生物试材和土壤试材的规范化水平，提高农药环境影响试验数据的质量。

1 国内外农药环境影响试验试材基本要求

1.1 生物试材及其规范化要求现行《农药登记资料要求》[3]中，生态毒理学试验资料涉及鸟类、鱼类、蜜蜂、家蚕、大型溞、绿藻、蚯蚓、赤眼蜂、瓢虫、浮萍、穗状狐尾藻等11个生物类型。在测试生物数量方面，由于现阶段生态保护目标的差异，我国要求测试的生物类型及测试物种均少于美国[4]及欧盟[5]的要求，比如暂未规定对底栖生物、海洋生物影响的资料要求，对鱼类和鸟类的测试种类数量也相对较少。在测试物种方面，除中国特有生物物种(如家蚕)和部分天敌生物(如赤眼蜂)，鱼类、鸟类、蜜蜂、蚯蚓、大型溞、绿藻等试材在物种方面国内外要求基本一致。

客观上，由于生态毒理学试验涉及的生物试材种类多、个体小、繁殖快、部分品种贮存与运输困难，在规范化管理方面不易像毒理试验中类似小白鼠等试验动物这样进行标准化管理。为了提高试验数据的可靠性、可比性和重复性，试验准则中[1，6]通常对试验生物的健康状况、体重、体长、雌雄比例(如鹌鹑)、生长季节(如蜜蜂)以及培养条件等进行规定。生物试材健康状况良好，前述指标在相关试验准则规定的范围之内，则理论上认为其合乎要求。此外，OECD和国内的试验准则[1，6]大多还规定了周期性参比物试验作为质控要求。例如，以重铬酸钾作为参比物，要求其对斑马鱼24h急性毒性LC50在200～400 mg/L之间，对大型溞24h急性毒性EC50在0.6～2.1 mg/L之间；以乐果作为参比物，其对蜜蜂48h急性经口毒性LD50应在0.20～0.30 μg/蜂之间，48h急性接触毒性LD50应在0.20～0.35 μg/蜂之间，0.2 g/ha施用量条件下对七星瓢虫的急性致死率应在40%～80%之间；以氯乙酰胺为参比物，对蚯蚓的14d急性毒性LC50应在20～80 mg a.i./kg干土范围内。除上述试验项目外，目前尚有10余个生态毒理试验标准未推荐参比物，或未明确参比物的毒性终点范围。国内制定的意大利蜜蜂幼虫发育试验准则中，推荐了乐果和苯氧威作为参比物，家蚕试验也推荐了乐果作为参比物，但未给出可参考的参比物毒性范围。

1.2 土壤试材及其规范化要求 OECD系列试验准则[6]中，土壤降解试验要求土壤质地为砂质壤土、粉壤土、壤土或壤质砂土；pH范围为5.5～8.0；土壤有机碳含量为0.5%～2.5%；微生物量>总有机碳的1%。土壤吸附和土壤淋溶试验对土壤的要求(表1、表2)。土壤表面光解试验(草案)要求使用粉壤土或粘壤土。欧盟农药原药资料要求(EC 283/2013)[5]中规定:用于降解、吸附/解吸附或迁移研究的供试土壤应具有代表性，在有机碳含量、粒径分布和pH方面具有一定差异；当降解或迁移可能与pH有关时，供试土壤应涵盖特定的pH范围(5～6、6～7、7～8)。

表1 OECD土壤吸附试验准则对土壤的要求[6]序号pH(0.01M CaCl2)有机碳含量(%)粘粒含量(%)土壤质地14.5～5.51.0～2.065～80粘土2>7.53.5～5.020～40粘壤土35.5～7.01.5～3.015～25粉壤土44.0～5.53.0～4.015～30壤土5<4.0～6.0<0.5～1.5<10～15壤质砂土6>7.0<0.5～1.040～65粘壤土/粘土7<4.5>10<10砂土/壤质砂土

表2 OECD土壤淋溶试验准则对土壤的要求[6]序号pH有机碳含量(%)粘粒含量(%)土壤质地1>7.53.5～5.020～40粘壤土25.5～7.01.5～3.015～25粉壤土34.0～5.53.0～4.015～30壤土4

文章来源：《生态毒理学报》网址: http://www.stdlxbzz.cn/qikandaodu/2021/0710/1571.html